人非小細胞肺癌細胞A549能通過(guò)(guò)胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽(yáng)(yáng)性。肺癌是常見(jiàn)(jiàn)的惡性腫瘤之一,已成為我國城市人口惡性腫瘤死亡原因的第1位。非小細胞型肺癌包括鱗狀細胞癌（鱗癌）、腺癌、大細胞癌，與小細胞癌相比其癌細胞生長(cháng)(cháng)分裂較慢,擴散轉移相對較晚。非小細胞肺癌約占所有肺癌的80%，約75%的患者發(fā)(fā)現時(shí)(shí)已處于中晚期，5年生存率很低。
人非小細胞肺癌細胞A549的傳代方法：
1、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加1mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀(guān)(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml全培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)(wú)菌離心管中，1000rpm離心5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
3、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。
人非小細胞肺癌細胞A549的凍存方法：
1、收集細胞及細胞培養液，裝入無(wú)(wú)菌離心管中，1000rpm條件下離心4min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加1mL血清重懸細胞，進(jìn)(jìn)行細胞計數。
2、根據細胞數量加入無(wú)(wú)血清細胞凍存液，使細胞密度5x106~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3、將凍存管放入-80℃冰箱，24h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
